产品货号：
SNM144
中文名称：
脂肪酶检测试剂盒(比色法)
英文名称：
Lipase assay kit
产品规格：
50管/48样
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
测定原理：
产品组成：
保存：4℃，有效期6个月。
自备器材：
注意事项：
样本处理：
使用方法：
操作过程：
计算公式：
C标准：标准浓度，454μmol/L；
V反总：反应液总体积，2.05mL；
V样：样本取样量，血清（浆）0.05mL，组织匀浆0.025mL；
T：反应时间，10分钟；
N：样本测试前稀释倍数；
Cpr：组织匀浆蛋白浓度，g/L；
组织样本测试前稀释倍数不包含组织前处理过程。
相关搜索：脂肪酶检测试剂盒(比色法)，脂肪酶检测，LPS检测，Lipase检测，Lipase assay kit
本试剂盒可检测各种动物血清（浆）、组织、细胞、培养液等样本中脂肪酶活性。
测定原理：
甘油三脂和水制成的乳胶，因其胶束对入射光的吸收及散射而具有乳浊性状。胶束中的甘油三脂在脂肪酶（Lipase；LPS）的作用下发生水解，使胶束分裂，散射光或浊度因而减低，减低的速率与脂肪酶活力有关。
产品组成：
| 组分 | 规格 |
| 试剂一：底物缓冲液 | 60mL×2 |
| 试剂二：Tris缓冲液 | 10mL |
| 试剂三 | 10mL |
保存：4℃，有效期6个月。
自备器材：
可见光分光光度计、1cm光径比色皿、涡旋混匀器、37℃水浴锅、生理盐水、蛋白测定试剂。
注意事项：
- 胰腺中脂肪酶含量很高，测定之前需做预实验以确定最佳取样浓度（△A≤0.4）。
- 比色皿每次比色前要用温蒸馏水洗涤干净后再进行下次比色。
- 约有3～5%的分析标本与底物作用后吸光度反而增加，一般是反复冻溶的标本及IgM增高的样本（如类风湿因子）。
- 试剂一临用前37℃预温后使用。
样本处理：
- 血清(浆)样本：直接取样检测，若是有固体存在，可4000转/分，离心5分钟，取上清检测；
- 组织样本：准确称取待测组织，按重量(g)∶体积(mL)=1∶4的比例加入4倍体积的生理盐水，冰水浴条件机械匀浆，4000转/分，离心10分钟，取上清液（20%匀浆上清）待测（该上清需测其蛋白浓度，用于计算）。
使用方法：
- 按下表加入各成分，配制反应体系，各管单独操作。
成分 标准管 血清(浆)测定管 组织匀浆测定管 生理盐水 50μL - - 血清(浆) - 50μL - 组织匀浆 - - 25μL 试剂三 - - 25μL 试剂一 2mL - 涡旋混匀，迅速倒入比色皿中，在分光光度计420nm处（1cm光径）比色，30秒时读取吸光度值A1，37℃保温，10分30秒时再次读取吸光度值A2，求△A测定=A1-A2，标准管只需读A1值即可。
操作过程：
- 将分光光度计于420nm处，1cm光径玻璃比色皿，用试剂二调零。
- 将试剂一37℃预温5分钟以上。
- 往相应编号的测定管中加入50μL血清（浆）（组织样本加匀浆25μL和试剂三25μL），吸取已预温好的试剂一2mL加入试管中，快速混匀并计时。
- 迅速倒入1cm光径比色皿中，在分光光度计420nm处比色，30秒时读取吸光度值A1。
- 将此反应液倒入原试管中置37℃水浴锅中反应，10分种时从水浴锅中取出，倒入比色皿中，再迅速放入分光光度计，10分30秒时读取吸光度值A2。
- 标准管先加入50μL生理盐水，再加入2mL试剂一，涡旋混匀，在分光光度计420nm处比色，记为As。
- 求出测定管2次吸光度差值（△A=A1-A2）。
计算公式：
- 标准管吸光度值AS，相当于标准管(454μmol/L)的浓度的吸光度值。
- 血清（浆）样本：
- 单位定义：在37℃条件下，每升血清(浆)在本反应体系中与底物反应1分钟，每消耗1μmol底物为一个酶活力单位。
- 计算公式：
血清(浆)LPS活力
(U/L)＝ A1－A2 ×C标准× V反总 ÷T×N As V样
- 单位定义：在37℃条件下，每升血清(浆)在本反应体系中与底物反应1分钟，每消耗1μmol底物为一个酶活力单位。
- 组织样本：
- 单位定义：在37℃条件下，每克组织蛋白在本反应体系中与底物反应1分钟，每消耗1μmol底物为一个酶活力单位。
- 计算公式：
组织LPS活力
(U/g蛋白)＝ A1－A2 ×C标准× V反总 ÷T×N÷Cpr As V样
- 单位定义：在37℃条件下，每克组织蛋白在本反应体系中与底物反应1分钟，每消耗1μmol底物为一个酶活力单位。
C标准：标准浓度，454μmol/L；
V反总：反应液总体积，2.05mL；
V样：样本取样量，血清（浆）0.05mL，组织匀浆0.025mL；
T：反应时间，10分钟；
N：样本测试前稀释倍数；
Cpr：组织匀浆蛋白浓度，g/L；
组织样本测试前稀释倍数不包含组织前处理过程。
相关搜索：脂肪酶检测试剂盒(比色法)，脂肪酶检测，LPS检测，Lipase检测，Lipase assay kit